Instituto Access, Universidade de Gurupi (UNIRG)

As cromatografias em coluna são métodos bioquímicos para o estudo da célula em que se é utilizada uma coluna feita de vidro, plástico, ou metal, que é preenchida com uma resina específica que atuará como elemento de separação de componentes da amostra que se pretende analisar. Os efeitos de separação numa cromatografia dependem da natureza da resina e podem ser de três tipos distintos: filtração em gel, troca iônica e afinidade.

Considerando os três tipos de cromatografias em coluna apresentados, analise as afirmativas a seguir:

1. I. Na filtração em gel, a resina é formada por esferas muito pequenas, contendo poros de tamanho definido. À medida que o líquido contendo a amostra escoa pela coluna, os componentes de diâmetro maior que a abertura dos poros da resina eluem primeiro, enquanto os menores atravessam os canais da resina e demoram mais a eluir da coluna. Obtém-se, assim, uma separação por tamanho, muito usada na separação de proteínas de diferentes pesos moleculares.
2. II. Na cromatografia de afinidade, as amostras percorrem uma resina formada por microesferas sem poros, mas que têm carga em sua superfície, o que faz reter os componentes da amostra que têm carga oposta. Caso os componentes retidos nas microesferas são os que se deseja estudar, é possível desligá-los da coluna com variações de pH ou de força iônica da resina.
3. III. A cromatografia de afinidade é mais eficiente que a cromatografia de filtração em gel ou a de troca iônica, porque, para essa metodologia fornecer bons resultados, é necessária a presença de um ligante específico para acoplar à resina e que a amostra, também, não contenha contaminantes. Por isso, geralmente usam-se os outros dois tipos de cromatografias para melhor preparar a amostra para, então, ser submetida à cromatografia de afinidade para purificar a proteína que se quer.

Assinale